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转铁蛋白(Transferrin)——无血清细胞培养添加物

2019/8/25 20:47:17发布157次查看
转铁蛋白(transferrin)
------无血清细胞培养添加物
>>>背景介绍
转铁蛋白又名运铁蛋白(transferrin,trf、tf),负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以三价铁复合物(tf-fe3+)的形式进入骨髓中,供成熟红细胞的生成。转铁蛋白主要存在于血浆中,血浆中的转铁蛋白供应机体绝大部分组织的铁,而在其不能到达的部位,由这些组织自己合成的转铁蛋白在局部产生转铁作用。
图1: 转铁蛋白的结构
人转铁蛋白(human transferrin)主要在肝脏合成,是由位于同源n-端和c-端的两个叶片(lobe)组成的一种单链糖蛋白。人转铁蛋白共含678个氨基酸残基,等电点为5.9、分子量为76kd。每分子的转铁蛋白能携带2个三价铁离子(fe3+)。转铁蛋白与fe3+的相互作用取决于ph,ph为7.4时,转铁蛋白与fe3+高效结合,在酸性ph下两者分离。
>>>存在形式
>>>作用机制
转铁蛋白(tf)结合铁是通过与其受体,即transferrin receptor 1(tfr1)相互作用而实现的。tfr1 是一种表达于细胞表面的糖蛋白,由两个同源二聚体的亚基通过二硫键连接而成。在细胞表面,tf与fe3+相互作用形成全铁-tf,并与tfr1受体结合,在细胞内吞作用下进入核内体。在偏酸性核内体的环境中,fe3+与tf分离,同时steap3将fe3+还原为fe2+,并被二价金属离子转运蛋白1(dmt1)转运到细胞质中,然后释放了fe3+的tf与tfr1组成tf/tfr1复合物,通过胞吐作用回游到细胞表面。在细胞表面,转帖蛋白(tf)与受体tfr1分离,成为脱铁-tf,然后再与fe3+重新结合参与铁循环。整个过程完成后tf和tfr1被循环利用,进入细胞摄取铁的下一个周期中。
图2: 转铁蛋白循环机理图
>>>转铁蛋白主要功能
>>>转铁蛋白来源
来源
安全性
批次差别
提取的转铁蛋白
从人、牛的血浆中提取
安全性差,最终产品可能含有病原体
转铁蛋白从不同批次的人血清或牛血清中提取,性能差别大
重组转铁蛋白
从原核、真核细胞中表达
安全性好,最终产品不含有病原体
每批次均用同一细胞株表达,性能稳定
>>>产品特点
安全性好:产品通过多层质检检测,避免了病原体的污染;
毒性小:细胞毒性非常低,对后续实验没有影响;
性能稳定:每批次均从同一细胞株中表达,性能差别小,蛋白纯度高
操作简单: 只需将产品加入培基中即可;
应用性广:可适用于不同类型细胞的培养。
>>>faq
q1:无血清培养基中应该添加提取的转铁蛋白,还是重组的转铁蛋白?
答:提取的转铁蛋白具有安全性差和批间差大等缺陷,尤其是将提取的转铁蛋白添加于用于细胞培养的无血清培养基中时,可能会将人或动物的病原体(如疯牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原体)带入细胞中,污染细胞。重组的转铁蛋白完全避免了病原体污染的可能性,因此无血清培养基中更应该添加重组的转铁蛋白。
q2:培养基中应该添加铁饱和(holo)转铁蛋白,还是脱铁(apo)转铁蛋白?
答:当培养基中不含铁或铁含量较低时,选择添加铁饱和(holo)的转铁蛋白;当培养基中富含铁时,选择脱铁转铁蛋白。
q3:铁饱和(holo)的转铁蛋白和脱铁(apo)的转铁蛋白,哪个效果好?
答:无法从理论上推断出两者的效果好坏,需要通过实验检测。
q4:转铁蛋白在无血清培养基中的浓度是多少?
答:转铁蛋白的浓度和细胞类型有关,具体的浓度与细胞状态、细胞浓度、实验目的有关。一般原代细胞:5-100mg/l;中国仓鼠卵巢细胞:10-50mg/l;杂交瘤和vero细胞:5-20mg/l
>>>订购信息
产品名称
货号
规格
价格(元)
牛脱铁转铁蛋白(bovine transferrin, apo)
40102es60
100 mg
868.00
bovine transferrin (holo) 牛饱和铁转铁蛋白
40103es80
1g
4236.00
human transferrin 人转铁蛋白
40133es60
100 mg
1187.00
hb20190807

上海翊圣生物科技有限公司
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